Die Protein Translocase SecYEG

Die membranständige Translokase von E. coli besteht aus 3 verschiedenen transmembranen Proteinuntereinheiten, welche für die Zelle alle essentiell sind. Der isolierte SecYEG Enzymkomplex soll funktionell und strukturell untersucht werden. Hierfür ist geplant, den gereinigten Komplex in einen Bilayer bzw. Liposomen zu rekonstituieren, Präkursorproteine zu isolieren und die Translokationsaktivität an diesem definierten System zu verfolgen. Die Untersuchungen sollen aufklären, wie die SecYEG Translokase mit dem SecA Protein sowie mit dem inserierenden Substrat interagiert und von welchen Faktoren (Membranpotential, ATP, Phospholipide) eine funktionelle Interaktion abhängig ist. Die spezifischen Bindungsstellen der Translokase an SecA und das Substrat sollen mit Hilfe chemischer crosslinker näher definiert werden. Literatur: Lill et al. (1990) Cell 60, 259-269; Schiebel, E. et al. (1991) Cell 64, 927-939; Bassilana, M. & W. Wickner (1993) Biochemistry 32, 2626-2630.